Colorations spéciales pour coupes congelées

Colorations spéciales pour coupes congelées

 

Le cryostat est un dispositif cryogénique qui permet de réaliser des coupes de tissus congelés d'une épaisseur de 4 à 50 µm.
La zone d'expérimentation est maintenue entre -10°C et -50°C. à l'intérieur un microtome permet de réaliser des coupes dans le tissu durci par la congélation. 
Les applications peuvent être diverses: la coloration structurale, l'immunohistochimie, l'hybridation in situ et la capture laser.
La coupe au cryostat est une technique rapide, de choix pour la mise en évidence d'antigène dit difficiles comme les antigènes liposoluble et d'autres antigènes.
 
Avec cette technique, il est possible de travailler sur tissus fixés ou non fixés.
L'avantage de cette technique est qu'il n'y a pas de dégradation des sites antigéniques : Protéine (enzyme, récepteur, mARN …) substance chimique (neurotransmetteur…) 
Les autres avantages sont les suivants :
  • Pas de déshydratation 
  • Pas de polymérisation 
  • Pas de chaleur 
  • Pas de réactions chimiques
Certains constituants des tissus comme les lipides sont dégradés lors des étapes de préparation du tissu inclus en paraffine, c'est pour cela qu'il existe des colorations spécifiques des coupes congelées.